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NEWS国自然热点聚焦,PG电子全光谱技术揭示中性粒细胞胞外陷阱(NETs)真相
来源:瞿刚武 日期:2025-03-21什么是中性粒细胞胞外陷阱(NETs)?中性粒细胞作为宿主抵御感染的“先锋部队”,主要采取三种作战手段:吞噬作用、脱颗粒作用和中性粒细胞胞外陷阱(NETs)。NETs顾名思义,是由DNA和蛋白质交织而成的特殊网状结构,能够有效捕捉并清除周围的微生物病原体。这种机制是一种新型的细胞死亡方式,称为中性粒细胞的炎性细胞死亡(NETosis),其具体表现为核膜破裂、染色质去凝集,以及细胞核、细胞质和颗粒成分的混合。
近年来,科学家们采用全光谱流式细胞术开发了新的NETs检测方案,以便从人的外周血中分离出粒细胞并识别NETs。这一方案依据中性粒细胞附着的胞外DNA(7AAD+)和多种NET相关颗粒蛋白(MPO+NE+H3cit+)来进行识别,并能够有效区分NETosis细胞(ZombieNIRdim7AAD+)与坏死细胞(ZombieNIR+7AAD+)。使用配置有3激光的Cytek®Aurora™全光谱分析型流式细胞仪,数据显示荧光组合之间的溢出扩散矩阵(SSM)非常小,表明此仪器在小方案的检测中表现出的卓越性能与数据质量。
研究人员对粒细胞进行了不同浓度的PMA刺激,以诱导NETs的形成,优化了NET+中性粒细胞的染色条件和门控策略。通过对髓过氧化物酶(MPO)活性及ZombieNIR阴性率的对比,确定了适宜的PMA浓度范围在19-133nM之间。随后,使用CytekAurora全光谱流式分析型流式细胞仪进行数据采集和分析,表现出CD66b+CD15+作为中性粒细胞的特征标记,并成功区分了NETs及坏死细胞的表型。更进一步,通过分析MPO、NE和H3cit等标记,可以精准锁定NET+中性粒细胞,DNase I处理后显著降低了NET+中性粒细胞的比例,证实了该方案对胞外DNA的特异性识别。
在炎性疾病患者的样本中,研究人员对比了稳定性冠心病(Stable CAD)和急性心肌梗死(AMI)的外周血样本,结果显示AMI患者的NET+中性粒细胞显著高于稳定性CAD患者。这表明,基于CytekAurora全光谱流式分析型流式细胞仪的新平台在临床中的应用潜力巨大,能够特异性识别有炎症反应的NET+中性粒细胞。
总结来说,构建的NETs检测平台有效提升了量化检测的准确性和特异性,通过多重标记识别NET+中性粒细胞。这一新方案不仅可以评估急性炎症患者中的NET+中性粒细胞积累,还具备较大的可扩展性,未来可考虑加入凋亡检测指标Annexin V,从而同时区分NET+、坏死及凋亡状态的中性粒细胞。此外,诸如嗜酸性粒细胞、肥大细胞及巨噬细胞等其他细胞类型中也观察到了胞外陷阱的形成,这为探索更多维度的研究和应用奠定了基础。随着技术的不断进步,**PG电子**也在不断推动生物医疗领域的创新。
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