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革兰氏染色配制与实验步骤- PG电子生物医疗解决方案

来源:宁馨珍 日期:2025-03-21

实验方法原理:本染色法是基础的染色手段,适用于标本涂片或菌落涂片的分析。通过该染色法,可以将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类,为微生物研究提供了重要依据。

革兰氏染色配制与实验步骤- PG电子生物医疗解决方案

实验步骤

一、实验试剂:

1. 结晶紫溶液:

A液:结晶紫2g,95%乙醇20ml。

B液:草酸铵0.8g,蒸馏水80ml。

在使用前24小时将A液和B液混合,过滤后装入试剂瓶内备用。

2. 碘液:

碘1g,碘化钾2g,蒸馏水300ml。

将碘与碘化钾混合并研磨,逐渐加入几毫升水以促使其溶解,继续研磨并逐渐加入少量蒸馏水至完全溶解,最后补足水量。也可先用少量蒸馏水将碘化钾完全溶解后,再加入碘片,待完全溶解后,加水至300ml。

3. 脱色液:

95%乙醇。

4. 复染液:

A贮存液:沙黄25g,95%乙醇100ml。

B应用液:A液10ml,蒸馏水90ml。

菌片制备:

染色的第一步是制作涂片。在进行菌液涂片时,使用接种环蘸取菌液点在载玻片上,或者可直接在玻片上涂布标本。针对菌落涂片,首先在玻片上滴一滴生理盐水,随后用接种针挑取菌落并涂布在盐水中。在涂片时需轻柔操作,避免剧烈动作造成细胞排列变化或鞭毛脱落,从而影响结果的准确性。制备的涂片需要自然干燥,并经火焰固定,固定时温度应控制在可接受范围内,确保不会导致细胞形态改变。完成固定后,便可进行染色。

二、染色方法:

1. 将涂片经火焰固定后,浸入结晶紫液中染色1分钟,然后用清水冲去染液。

2. 加入碘液染色1分钟,随后水洗。

3. 使用脱色液,轻轻摇动约30秒,直至无紫色脱落,然后进行水洗。

4. 加入复染液,染色30秒后再用水洗。

5. 最后待其自然干燥后进行镜检。

通过以上步骤,您可以对微生物样本进行有效的形态学分析,结合PG电子的实验产品,确保实验过程的高效与精准。我们的产品能够帮助生物医疗专业人员提升实验效果,获得更可靠的实验结果。

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